本標準適用于牦牛生乳，不適用于即食牦牛生乳

本文件規(guī)定適用于綿羊生乳，經(jīng)擠奶、原乳過濾、冷卻（2~4℃）、貯乳等工序生產(chǎn)的無任何成分改變的生乳

本文件不適用于即食生乳

感官要求、理化指標、有害物質(zhì)限量、真菌毒素限量、微生物限量、農(nóng)藥殘留和獸藥殘留限量

吸取200μL樣品待測液于金標微孔（5.3.1）中，抽吸5～10次使混合均勻，35℃溫育5min，將檢測試紙條（5.3.2）樣品端垂直向下插入金標微孔中，35℃溫育5min，取出試紙條，對結果進行判定。注1：測定步驟建議按照試紙條說明書。注2：結果判定可使用膠體金讀數(shù)儀，讀數(shù)儀的具體使用參照儀器使用說明書。

吸取200μL樣品待測液于金標微孔（5.3.1）中，抽吸5～10次使混合均勻，35℃溫育5min，將檢測試紙條（5.3.2）樣品端垂直向下插入金標微孔中，35℃溫育5min，取出試紙條，對結果進行判定。注1：測定步驟建議按照試紙條說明書。注2：結果判定可使用膠體金讀數(shù)儀，讀數(shù)儀的具體使用參照儀器使用說明書。

吸取200μL樣品待測液于金標微孔（5.3.1）中，抽吸5～10次使混合均勻，35℃溫育5min，將檢測試紙條（5.3.2）樣品端垂直向下插入金標微孔中，35℃溫育5min，取出試紙條，對結果進行判定。注1：測定步驟建議按照試紙條說明書。注2：結果判定可使用膠體金讀數(shù)儀，讀數(shù)儀的具體使用參照儀器使用說明書。

本規(guī)范適用于基于熱敏電阻測量冰點溫度的生乳冰點儀的校準。

本文件規(guī)定了沙漠有機生乳的生產(chǎn)、感官控制、理化指標控制、微生物控制、體細胞數(shù)控制等要求

本文件適用于沙漠有機生乳的生產(chǎn)

本方法規(guī)定了生乳中吡蟲啉的膠體金免疫層析快速檢測方法本方法適用于生乳中吡蟲啉的快速測定3　原理本方法采用競爭抑制免疫層析原理

樣品中的吡蟲啉經(jīng)提取后與膠體金標記的特異性抗體結合，抑制了抗體和試紙條中檢測線（T線）上抗原的結合，從而導致檢測線顏色深淺的變化

通過檢測線與質(zhì)控線（C線）顏色深淺比較，對樣品中吡蟲啉進行定性判定

4　試劑與材料4.1　試劑除另有說明外，所有試劑均為分析純，實驗室用水應符合GB/T6682中二級水的要求

4.1.1　甲醇（CH3OH）

4.1.2　參考物質(zhì)：吡蟲啉參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量見表1，純度≥98%

表1　吡蟲啉參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量中文名稱　英文名稱　CAS登錄號　分子式　相對分子質(zhì)量吡蟲啉　Imidacloprid　138261-41-3　C9H10ClN5O2　255.7注：或等同可溯源物質(zhì)

4.2　溶液配制4.2.1　吡蟲啉標準儲備液（100μg/mL）：準確稱取吡蟲啉參考物質(zhì)（4.1.2）1mg，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為100μg/mL的吡蟲啉標準儲備液

4℃避光保存，有效期6個月

4.2.2　吡蟲啉標準工作液（1μg/mL）：精密移取吡蟲啉標準儲備液（100μg/mL）（4.2.1）0.1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為1μg/mL的吡蟲啉標準工作液

臨用新配

4.3　材料吡蟲啉膠體金免疫層析試紙條，適用基質(zhì)為生乳

需在陰涼、干燥、避光條件下保存

4.3.1　金標微孔（含膠體金標記的特異性抗體）

4.3.2　試紙條

5　儀器與設備5.1　電子天平：感量為0.01g

5.2　移液器：10μL~200μL、100μL~1000μL

5.3　迷你金屬浴

6　分析步驟6.1　試樣制備取適量有代表性樣品充分混勻

6.2　試樣提取以生乳為基質(zhì)的樣品可直接上樣檢測或根據(jù)產(chǎn)品說明書稀釋后檢測

6.3　測定步驟吸取200μL樣品待測液于金標微孔（4.3.1）中，抽吸5~10次使混合均勻，35℃溫育5min，將檢測試紙條（4.3.2）樣品端垂直向下插入金標微孔中，35℃溫育5min，取出試紙條，對結果進行判定

注1：測定步驟建議按照試紙條說明書

注2：結果判定建議使用讀數(shù)儀，讀數(shù)儀的具體使用參照儀器使用說明書

6.4　質(zhì)控試驗每批樣品應同時進行空白試驗和加標質(zhì)控試驗

6.4.1　空白試驗稱取空白試樣，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作

6.4.2　加標質(zhì)控試驗準確移取空白試樣1.9mL放入離心管中，加入0.1mL吡蟲啉標準工作液（1μg/mL）（4.2.2），使試樣中吡蟲啉濃度為50μg/L，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作

7　結果判定7.1　讀數(shù)儀測定按讀數(shù)儀說明書要求操作，直接讀數(shù)并進行結果判定

7.2　目視判定通過對比質(zhì)控線（C線）和檢測線（T線）的顏色深淺進行結果判定

目視判定示意圖見圖1

7.2.1　無效質(zhì)控線（C線）不顯色，無論檢測線（T線）是否顯色，表明操作不正確或試紙條已失效，檢測結果無效

7.2.2　陽性結果質(zhì)控線（C線）顯色，檢測線（T線）不顯色或顏色淺于質(zhì)控線（C線），表明樣品中吡蟲啉含量高于方法檢出限，判定為陽性

7.2.3　陰性結果質(zhì)控線（C線）顯色，檢測線（T線）顏色深于質(zhì)控線（C線）或與質(zhì)控線（C線）顏色基本一致，表明樣品中吡蟲啉含量低于方法檢出限，判定為陰性

圖1　目視判定示意圖7.3　質(zhì)控試驗要求空白試驗測定結果應為陰性，加標質(zhì)控試驗測定結果應為陽性

8　結果確認當檢測結果為陽性時，應按照GB2763指定方法標準進行確證

9　性能指標9.1　檢出限：50μg/L

9.2　靈敏度：≥95%

9.3　特異性：≥90%

9.4　假陰性率：≤5%

9.5　假陽性率：≤10%

注：性能指標計算方法見附錄A

10　其他本方法所述試劑、試紙條信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不做限定

方法使用者應使用經(jīng)過驗證的滿足本方法規(guī)定的各項性能指標的試劑、試紙條

本方法規(guī)定了生乳中啶蟲脒的膠體金免疫層析快速檢測方法本方法適用于生乳中啶蟲脒的快速測定3　原理本方法采用競爭抑制免疫層析原理

樣品中的啶蟲脒經(jīng)提取后與膠體金標記的特異性抗體結合，抑制了抗體和試紙條中檢測線（T線）上抗原的結合，從而導致檢測線顏色深淺的變化

通過檢測線與質(zhì)控線（C線）顏色深淺比較，對樣品中啶蟲脒進行定性判定

4　試劑與材料4.1　試劑除另有說明外，所有試劑均為分析純，實驗室用水應符合GB/T6682中二級水的要求

4.1.1　甲醇（CH3OH）

4.1.2　參考物質(zhì)：啶蟲脒參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量見表1，純度≥98%

表1　啶蟲脒參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量中文名稱　英文名稱　CAS登錄號　分子式　相對分子質(zhì)量啶蟲脒　Acetamiprid　160430-64-8　C10H11ClN4　222.68注：或等同可溯源物質(zhì)

4.2　溶液配制4.2.1　啶蟲脒標準儲備液（100μg/mL）：準確稱取啶蟲脒參考物質(zhì)（4.1.2）1mg，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為100μg/mL的啶蟲脒標準儲備液

4℃避光保存，有效期6個月

4.2.2　啶蟲脒標準工作液（1μg/mL）：精密移取啶蟲脒標準儲備液（100μg/mL）（4.2.1）0.1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為1μg/mL的啶蟲脒標準工作液

臨用新配

4.3　材料啶蟲脒膠體金免疫層析試紙條，適用基質(zhì)為生乳

需在陰涼、干燥、避光條件下保存

4.3.1　金標微孔（含膠體金標記的特異性抗體）

4.3.2　試紙條

5　儀器與設備5.1　電子天平：感量為0.01g

5.2　移液器：10μL~200μL、100μL~1000μL

5.3　迷你金屬浴

6　分析步驟6.1　試樣制備取適量有代表性樣品充分混勻

6.2　試樣提取以生乳為基質(zhì)的樣品可直接上樣檢測或根據(jù)產(chǎn)品說明書稀釋后檢測

6.3　測定步驟吸取200μL樣品待測液于金標微孔（4.3.1）中，抽吸5~10次使混合均勻，35℃溫育5min，將檢測試紙條（4.3.2）樣品端垂直向下插入金標微孔中，35℃溫育5min，取出試紙條，對結果進行判定

注1：測定步驟建議按照試紙條說明書

注2：結果判定建議使用讀數(shù)儀，讀數(shù)儀的具體使用參照儀器使用說明書

6.4　質(zhì)控試驗每批樣品應同時進行空白試驗和加標質(zhì)控試驗

6.4.1　空白試驗稱取空白試樣，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作

6.4.2　加標質(zhì)控試驗準確移取空白試樣10mL放入離心管中，加入0.1mL啶蟲脒標準工作液（1μg/mL）（4.2.2），使試樣中啶蟲脒濃度為10μg/L，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作

7　結果判定7.1　讀數(shù)儀測定按讀數(shù)儀說明書要求操作，直接讀數(shù)并進行結果判定

7.2　目視判定通過對比質(zhì)控線（C線）和檢測線（T線）的顏色深淺進行結果判定

目視判定示意圖見圖1

7.2.1　無效質(zhì)控線（C線）不顯色，無論檢測線（T線）是否顯色，表明操作不正確或試紙條已失效，檢測結果無效

7.2.2　陽性結果質(zhì)控線（C線）顯色，檢測線（T線）不顯色或顏色淺于質(zhì)控線（C線），表明樣品中啶蟲脒含量高于方法檢出限，判定為陽性

7.2.3　陰性結果質(zhì)控線（C線）顯色，檢測線（T線）顏色深于質(zhì)控線（C線）或與質(zhì)控線（C線）顏色基本一致，表明樣品中啶蟲脒含量低于方法檢出限，判定為陰性

圖1　目視判定示意圖7.3　質(zhì)控試驗要求空白試驗測定結果應為陰性，加標質(zhì)控試驗測定結果應為陽性

8　結果確認當檢測結果為陽性時，應按照GB2763指定方法標準進行確證

9　性能指標9.1　檢出限：10μg/L

9.2　靈敏度：≥95%

9.3　特異性：≥90%

9.4　假陰性率：≤5%

9.5　假陽性率：≤10%

注：性能指標計算方法見附錄A

10　其他本方法所述試劑、試紙條信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不做限定

方法使用者應使用經(jīng)過驗證的滿足本方法規(guī)定的各項性能指標的試劑、試紙條

本標準適用于生乳，不適用于即食生乳本標準適用于生乳，不適用于即食生乳

地方標準《德州驢生乳》，主管部門為山東省市場監(jiān)督管理局。

地方標準《奶山羊生乳質(zhì)量管理規(guī)范》，主管部門為山東省質(zhì)量技術監(jiān)督局。

行業(yè)標準《奶牛養(yǎng)殖場生乳中病原微生物風險評估技術規(guī)范》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本文件規(guī)定了奶牛養(yǎng)殖場生乳中病原微生物風險評估的工作流程、危害識別、風險監(jiān)測和風險分級等要求。本文件適用于奶牛養(yǎng)殖場生乳中病原微生物的風險評估。本文件規(guī)定了奶牛養(yǎng)殖場生乳中病原微生物風險評估的工作流程、危害識別、風險監(jiān)測和風險分級等要求。本文件適用于奶牛養(yǎng)殖場生乳中病原微生物的風險評估。

行業(yè)標準《生乳中鉛的控制技術規(guī)范》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本文件規(guī)定了生乳生產(chǎn)和儲運過程中對鉛含量的控制要求，以及生乳中鉛含量的檢測、糾偏、核實和心錄要求。本文件適用于生乳生產(chǎn)和儲運過程中鉛的控制。本文件規(guī)定了生乳生產(chǎn)和儲運過程中對鉛含量的控制要求，以及生乳中鉛含量的檢測、糾偏、核實和記錄要求。本文件適用于生乳生產(chǎn)和儲運過程中鉛的控制。

行業(yè)標準《生乳及其制品中堿性磷酸酶活性的測定 發(fā)光法》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了生乳及其制品中堿性磷酸酶活性測定的發(fā)光法。本標準適用于牛、羊、水牛、牦牛等不同奶畜生乳及其制品(巴氏殺菌乳、調(diào)制乳、奶油等)中堿性磷酸酶的測定。本標準的檢出限為20mU/L，定量限為60mU/L。