本文件規(guī)定了蔬菜中毒死蜱、克百威、阿維菌素膠體金免疫層析法

本文件適用于韭菜、芹菜、豇豆、姜等蔬菜中毒死蜱、克百威、阿維菌素的快速測定

本方法規(guī)定了蔬菜水果中毒死蜱的膠體金免疫層析快速檢測方法本方法適用于抱子甘藍、豇豆、韭菜、蘋果等蔬菜水果中毒死蜱的快速測定3　原理本方法采用競爭抑制免疫層析原理

樣品中的毒死蜱經(jīng)提取后與膠體金標記的特異性抗體結(jié)合，抑制了抗體和試紙條中檢測線（T線）上抗原的結(jié)合，從而導致檢測線顏色深淺的變化

通過檢測線與質(zhì)控線（C線）顏色深淺比較，對樣品中毒死蜱進行定性判定

4　試劑與材料4.1　試劑除另有說明外，所有試劑均為分析純，實驗室用水應符合GB/T6682中二級水的要求

4.1.1　甲醇（CH3OH）

4.1.2　提取液：由膠體金免疫層析試紙條配套提供，或按照其說明書配制

4.1.3　參考物質(zhì)：毒死蜱參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量見表1，純度≥98%

表1　毒死蜱參考物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS登錄號、分子式、相對分子質(zhì)量中文名稱　英文名稱　CAS登錄號　分子式　相對分子質(zhì)量毒死蜱　Chlorpyrifos　2921-88-2　C9H11Cl3NO3PS　350.6注：或等同可溯源物質(zhì)

4.2　溶液配制4.2.1　毒死蜱標準儲備液（100μg/mL）：準確稱取毒死蜱參考物質(zhì)（4.1.3）1mg，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為100μg/mL的毒死蜱標準儲備液

4℃避光保存，有效期6個月

4.2.2　毒死蜱標準工作液（1μg/mL）：精密移取毒死蜱標準儲備液（100μg/mL）（4.2.1）0.1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇（4.1.1）稀釋至刻度，搖勻，制成濃度為1μg/mL的毒死蜱標準工作液

臨用新配

4.3　材料毒死蜱膠體金免疫層析試紙條，適用基質(zhì)為蔬菜水果

需在陰涼、干燥、避光條件下保存

4.3.1　金標微孔（含膠體金標記的特異性抗體）

4.3.2　檢測卡

5　儀器與設備5.1　電子天平：感量為0.01g

5.2　移液器：10μL~200μL、100μL~1000μL

6　分析步驟6.1　試樣制備選取新鮮樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，備用

6.2　試樣提取稱取2g試樣（精確至0.05g）放入離心管中，加入6mL提取液（4.1.2），上下振蕩1min，靜置5min，上清液即為樣品待測液

6.3　測定步驟吸取100μL樣品待測液于金標微孔（4.3.1）中，抽吸2~3次使混合均勻，室溫溫育3min，吸取100μL混勻液加入檢測卡的加樣孔中，室溫反應10min后進行結(jié)果判定

注1：測定步驟建議按照試紙條說明書

注2：結(jié)果判定建議使用讀數(shù)儀，讀數(shù)儀的具體使用參照儀器使用說明書

6.4　質(zhì)控試驗每批樣品應同時進行空白試驗和加標質(zhì)控試驗

6.4.1　空白試驗稱取空白試樣，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作

6.4.2　加標質(zhì)控試驗準確稱取空白試樣2g（精確至0.05g）放入離心管中，加入40μL毒死蜱標準工作液（1μg/mL）（4.2.2），使試樣中毒死蜱濃度為0.02mg/kg，按照6.2和6.3步驟與樣品同法操作

7　結(jié)果判定7.1　讀數(shù)儀測定按讀數(shù)儀說明書要求操作，直接讀數(shù)并進行結(jié)果判定

7.2　目視判定通過對比質(zhì)控線（C線）和檢測線（T線）的顏色深淺進行結(jié)果判定

目視判定示意圖見圖1

7.2.1　無效質(zhì)控線（C線）不顯色，無論檢測線（T線）是否顯色，表明操作不正確或試紙條已失效，檢測結(jié)果無效

7.2.2　陽性結(jié)果質(zhì)控線（C線）顯色，檢測線（T線）不顯色或顏色淺于質(zhì)控線（C線），表明樣品中毒死蜱含量高于方法檢出限，判定為陽性

7.2.3　陰性結(jié)果質(zhì)控線（C線）顯色，檢測線（T線）顏色深于質(zhì)控線（C線）或與質(zhì)控線（C線）顏色基本一致，表明樣品中毒死蜱含量低于方法檢出限，判定為陰性

圖1　目視判定示意圖7.3　質(zhì)控試驗要求空白試驗測定結(jié)果應為陰性，加標質(zhì)控試驗測定結(jié)果應為陽性

8　結(jié)果確認當檢測結(jié)果為陽性時，應按照GB2763指定方法標準進行確證

9　性能指標9.1　檢出限：0.02mg/kg

9.2　靈敏度：≥95%

9.3　特異性：≥90%

9.4　假陰性率：≤5%

9.5　假陽性率：≤10%

注：性能指標計算方法見附錄A

10　其他本方法所述試劑、試紙條信息及操作步驟是為給方法使用者提供方便，在使用本方法時不做限定

方法使用者應使用經(jīng)過驗證的滿足本方法規(guī)定的各項性能指標的試劑、試紙條

本標準規(guī)定了蔬菜及水果中毒死蜱殘留量的酶聯(lián)免疫吸附測定法本標準適用于蔬菜及水果中毒死蜱殘留量的測定采用間接競爭酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）方法，在微孔條上包被偶聯(lián)抗原，試樣中殘留的毒死蜱與酶標板上的偶聯(lián)抗原競爭毒死蜱抗體，加入酶標記的抗體后，顯色劑顯色，終止液終止反應

用酶標儀在450nm處測定吸光度，吸光值與毒死蜱殘留量呈負相關，與標準曲線比較，再乘以其對應的稀釋倍數(shù)，即可得出毒死蜱殘留含量

本標準規(guī)定了大米中甲基毒死蜱農(nóng)藥殘留量的膠體金檢測方法的原理、試劑與材料、試樣制備、測定、結(jié)果判定與表述和檢測限與特異性本標準適用于大米中甲基毒死蜱農(nóng)藥殘留的快速檢測利用免疫測定中競爭法檢測原理，通過在檢測區(qū)包被一定量的包被抗原，質(zhì)控區(qū)包被羊抗鼠多克隆抗體，利用膠體金標記的抗體與樣品及檢測區(qū)的物質(zhì)之間的競爭反應，觀測在試紙條的檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)呈現(xiàn)的反應結(jié)果（試紙條出現(xiàn)色帶），然后根據(jù)色帶顏色的有無或深淺，判斷農(nóng)藥檢出或超標

本文件規(guī)定了蔬菜、水果中毒死蜱農(nóng)藥的免疫層析電化學檢測技術的原理、試劑與材料、儀器與設備、試樣制備、測定、結(jié)果計算與表述、重復性和檢測限與特異性本文件適用于蘋果、菠蘿、菠菜、馬鈴薯等果蔬中毒死蜱農(nóng)藥的在線篩查和快速監(jiān)測蔬菜、水果中毒死蜱農(nóng)藥的免疫層析電化學檢測技術的原理、試劑與材料、儀器與設備、試樣制備、測定、結(jié)果計算與表述、重復性和檢測限與特異性

地方標準《白酒中毒死蜱殘留量的測定 氣相色譜法》由松滋市市場監(jiān)督管理局歸口上報，主管部門為荊州市。本文件規(guī)定了白酒中毒死蜱殘留量的氣相色譜測定方法。本文件適用于白酒中毒死蜱殘留量的測定。

地方標準《水質(zhì)　毒死蜱的測定　固相萃取-液相色譜法》，主管部門為山東省市場監(jiān)督管理局。

地方標準《毒死蜱、三唑磷、二嗪磷中治螟磷成分的測定 氣相色譜法》，主管部門為江蘇省質(zhì)量技術監(jiān)督局。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 胡蘿卜》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 芋頭》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 蘿卜》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 甘蔗》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 花生》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 大豆（干）》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。

行業(yè)標準《農(nóng)藥最大殘留限量 毒死蜱 棉籽》，主管部門為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部。本標準規(guī)定了農(nóng)產(chǎn)品中艾氏劑等44種農(nóng)藥的最大殘留限量。本標準適用于表1所列農(nóng)藥對應的農(nóng)產(chǎn)品。